Toda forma de fósforo presente em águas naturais,
encontra-se sob a forma de fosfato, o qual está presente sob diversas formas,
segundo Esteves (1998):
1. Fosfato
particulado
2. Fosfato
orgânico dissolvido
3. Fosfato
inorgânico dissolvido ou ortofosfato ou fosfato reativo
4. Fosfato
total dissolvido
5. Fosfato
total
Princípio do método
para determinação do teor de fosfato orgânico dissolvido:
O
ortofosfato é normalmente medido através do método colorimétrico do azul de
molibdênio.
Existem
diversos métodos colorimétricos, com diferentes acurácias, o método que se
utiliza do ácido ascórbico é ideal para medir concentrações de 0.01 a 6 mg P/L.
Reagentes para determinação do teor de
ortofosfato, de acordo com Strickland & Parsons (1960):
1) solução padrão
estoque de fosfato monobásico de potássio (KH2PO4 - 40 mg de P-PO4-3/ml)
Dissolver
0,1757 g de fosfato monobásico de potássio (seco a 1100C e esfriado
em dessecador) a 1l de água destilada, armazenar em frasco de vidro âmbar na
geladeira.
2) molibdato de
amônio ((NH4)6Mo7O24.4H20)
Dissolver 15 g de molibdato de amônio em 500
ml de água destilada, estocar em frasco de plástico e no escuro. Essa solução
poderá ser utilizada enquanto permanecer clara.
3) ácido sulfúrico (H2SO4)
Dissolver 140 ml de ácido sulfúrico P.A. (36 N, 96~97%,
densidade de 1,18 g/cm3) em 900 ml de água destilada. Guardar em frasco âmbar fora da
geladeira.
4) ácido ascórbico (C6H8O6)
Diariamente, dissolver 1,35 g de ácido ascórbico P.A. em 25 ml de água
destilada.
5) tartarato de
antimônio e potássio (K(SbO)C6HO6)
Dissolver
0,34 g de tartarato de antimônio e potássio P.A. em 250 ml de água destilada e
estocar em frasco de vidro. Essa solução poderá ser utilizada enquanto
permanecer clara.
6)
Confecção do reagente misto
Adicionar,
nos volumes sugeridos, os reagentes listados na tabela 2.
Tabela 1- Reagentes e volumes sugeridos na confecção de
reagente misto para determinação do teor de ortofosfato.
Reagente
|
Quantidade
1
|
Quantidade
2
|
Quantidade
3
|
Quantidade
4
|
Molibdato
de amônio
|
25 ml
|
20 ml
|
10 ml
|
5 ml
|
H2SO4
(diluído,
guardado em geladeira)
|
62,5 ml
|
50 ml
|
25 ml
|
12,5 ml
|
Ác.
Ascórbico(*)
|
25 ml
|
20 ml
|
10 ml
|
5 ml
|
Tartarato
|
12,5 ml
|
10 ml
|
5 ml
|
2,5 ml
|
Volume
final (ml)
|
125
|
100
|
50
|
25
|
Quantidade
de tubos
|
75
|
55
|
25
|
12
|
(*) Preparação
do ácido ascórbico (C6H8O6): diariamente dissolver
1,35 g de ácido ascórbico em 25 ml de água destilada.
Caso o reagente misto não seja utilizado
imediatamente, guarde-o no escuro.
Procedimento com as amostras para
determinação do teor de ortofosfato, de acordo com Strickland & Parsons
(1960):
- Colocar
10 ml da amostra de água filtrada em tubos de ensaio;
- Adicionar
1,0 ml do reagente misto, agitar;
- Após
20 minutos ler a absorbância contra o menor branco a 882 nm.
Determinação
do teor de fosfato inorgânico dissolvido. Disponível em: <http://webcache.googleusercontent.com/search?q=cache:cwcarib20fsj:ecologia.ib.usp.br/portal/index.php%3foption%3dcom_docman%26task%3ddoc_download%26gid%3d31%26itemid%3d425+&cd=2&hl=pt-br&ct=clnk&gl=br>
acesso em: 14/07/2013.
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